除了RET融合检测外，其他实体瘤患者可能还需要根据待定临床试验的结果进行RET突变检测，最好通过NGS来完成，如果NGS不可及，可以使用Q-PCR。

目前对RET基因融合检测的推荐已经在很多国内外指南和共识中有所体现：

• 2020年CSCO非小细胞肺癌诊疗指南推荐：对不可手术和晚期NSCLC患者进行RET基因检测，随着普拉替尼的获批，检测应该会从二级推荐升至一级推荐级别。
• 美国NCCN指南也强烈建议除了常见的EGFR、ALK和ROS1外，应进行相对少见驱动基因的广泛检测，其中就包括RET融合，有助于鉴定出可以进行相应靶向治疗的驱动基因阳性肺癌患者。
• 我国首部《中国非小细胞肺癌RET基因融合临床检测专家共识》中也列举了4类RET检测的适用人群：（1）强烈推荐所有经病理诊断为肺腺癌（包括含腺癌成分的NSCLC）的晚期患者进行RET基因检测。（2）推荐经活检组织病理学证实为非腺癌的晚期NSCLC患者进行RET基因检测。（3）推荐EGFR-TKI及ALK-TKI耐药患者进行RET基因融合检测。（4）推荐术后明确为浸润性腺癌的患者，除检测常见驱动基因变异（EGFR、ALK）外，应考虑检测包括RET基因融合在内其他罕见基因变异。

提高检测质控意识，规范RET相关基因检测
在临床实践中，多种检测方式已应用于检测RET基因融合，但灵敏度和特异度不同，各具有优缺点。目前RET检测临床应用最多的是NGS和PCR，FISH则作为第二平台的验证非常重要。

NGS检测分为DNA和RNA水平，RET在 DNA层面上检测敏感性几乎可以达到100%，但是部分研究中也存在漏检，其他一些罕见融合存在假阳性的问题；RNA层面的检测虽然方便，但是RNA的质量和数量也会影响到检测结果。

PCR可以实现联合检测，通过提取RNA进行多基因检测,尽管PCR非常方便快速，也存在以下缺点：

• 只能检测已知融合基因，会有大约2%的罕见融合假阴性
• 检测需要mRNA，从很少的肿瘤组织中提取RNA具有一定的挑战性，部分患者样本不一定能够满足检测要求

随着普拉替尼的获批，临床检测会越来越多，RET融合检测亟需规范化。

为了指导临床检测获得准确的结果，使患者得到最大限度的获益，《中国非小细胞肺癌RET基因融合临床检测专家共识》中除了分析常用RET基因融合检测方法和判读标准外，也对其检测流程阐述了注意事项及做好室内外质控的规范化要求：

• 在检测方法和检测策略方面，共识强烈推荐的有两种方法，一个是基于融合表达的、mRNA层面上的RT-PCR，另一个是NGS。
• 检测医师应根据送检标本的类型、数量及质量﹑所检基因变异类型和数量，以及实验室条件等合理选择检测方式，必要时行多平台检测互补和验证。
• RET基因融合检测需做好室内外质控，并建立有效的临床病理沟通机制，使整个检测流程能够提高周期性、完整性和全面性。

菁良解决方案
菁良基因的肿瘤融合FFPE标准品，包含RT-PCR验证的融合表达位点，及数字PCR验证的基因融合位点，成品为福尔马林固定，石蜡包埋处理的FFPE切片，主要用于基因融合检测流程的质量控制和性能验证。