抗原-抗体结合反应的特点
抗原-抗体结合反应的专一性称为特异性,这是由于抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间在化学结构和空间结构型上是互补关系。如果表位结构有很小的差异就会阻止两者的特异性结合。如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位,则对于一种抗原的抗血清可与另一种抗原发生反应,即交叉反应(Cross reaction)。这是由于天然抗原表面常常带有多种抗原表位,每种表位均能刺激机体产生一种特异性抗体,即一个抗原分子会刺激机体产生多种特异性抗体。一般来说多克隆抗体比单克隆抗体更容易发生交叉反应。
抗原抗体反应时,只有在两者分子比例合适的时候才会出现最强的反应,些时称为抗原-抗体反应的等价带(Zone of equivalence),如果一方过剩,早于过剩一方的结合价不能被完全占据,多呈游离的小分子复合物形成,或形成的复合物易解离,不能被肉眼察见。在等价带前后分别为抗体过剩还和抗原过剩带,此时两者比例不适合,沉淀量少,上清液中可测邮游离的抗原或抗体;其中抗体过剩时为前带现象(Prezone),抗原过剩时为后带现象(Postzone)。如果两比例合适,抗体分子的两个Fab片段分别与两个抗原表位结合后相互交联形成具有立体结构的巨大网格状复合体,在反应体系中基本不存在游离的抗原或抗体,此时形成肉眼可以分辨的沉淀物或凝集物。当两者比例不合适时,只能形成较小的沉淀物或可溶性的复合物。
抗原抗体的结合取于两个因素:一是抗体对相应抗原的亲和国;二是环境因素对复合物的影响。高亲各性的抗体上抗原结合点与抗原表位在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离;低亲和性抗体与抗原形成的复合物较易解离、在一定的外界环境下如低pH、高浓度盐、反复冻融下,抗原抗体复合物也可被解离,解离后的抗原抗体仍保持原有的结构、活性及特异性。其中改变pH和离子强度是最常用的促进解离的方法,借此可利用亲和色谱的方法来纯化抗原或抗体。